Клеточное обновление в слизистой оболочке желудка и кишечника

Способы оценки апоптоза

Способов оценки апоптоза известно много, мы ограничимся лишь упоминанием тех, применение которых возможно в клинической морфологии. Краткое описание методов приведено нами в таблице 3. Все методы так или иначе основаны на выявлении нарушения структуры ДНК на ранней или промежуточной фазе апоптоза. Следует отметить, что метод с внесением метки в концевой фрагмент ДНК более точный, так как его чувствительность выше и он может выявлять больше клеток в раннюю фазу апоптоза. ДНК полимераза встраивает нуклеотиды в место разрыва одной из цепей ДНК. и теоретически эта реакция может происходить не только в клетках, находящихся в апоптозе. но и подвергающихся некрозу, при котором также происходит разрушение ДНК. Поэтому предпочтительнее использовать метод с внесением метки в концевой фрагмент ДНК, так как такая реакция происходит в клетках, подвергшихся апоптозу.

Все указанные методы применяются достаточно широко, особенно распространено использование методики TUNEL (TdT-mediated X-dUTP nick end labeling) в связи с высокой чувствительностью и наличием большого количества промышленно выпускаемых наборов для этой методики. Тем не менее, использование данного метода сдерживается достаточно высокой стоимостью реактивов, особенно меченных нуклеотидов. С этой точки зрения, предложенная X.L1 и Z.Darzynkiewicz модификация метода с использованием бромдсоксиуридинтрифосфата заслуживает особого внимания, так как его стоимость на несколько порядков ниже модифицированных нуклеотидов. меченных биотипом или FITC. Более того, чувствительность модифицированного метода оказалась в 2-3 раза.